园艺作物育种浅谈染色体工程

诱发多倍体技术 秋水仙素是育种工作者用于染色体数目加倍的一种非常重要的化学物质。其作用是抑制细胞有丝分裂中纺锤丝形成和阻滞染色体运动，从而使染色体分散，但不形成新的细胞壁，因此，使经处理的细胞多出一组额外的染色体。
秋水仙素有巨毒，使用时必须小心。常用的剂量为0.05——0.2％，溶液最好新鲜配制。在配制时，应先将其粉末溶解在几滴工业酒精中，而后再补足需加的水。
处理单子叶植物的种子或籽苗时，可直接浸渍于秋水仙素溶液。但处理双子叶的籽苗时，通常是将一滴秋水仙素溶液滴在生长点上，在子叶张开后，每天滴一次或两次，连续滴几天。如果植株表面有蜡质或毛，可以先将植株浸湿，然后再滴。除此之外，已长大的植株或它的一部分，也可以处理，但必须是分生组织或愈伤组织。有时，处理茎上的腋芽、接穗和砧木切割的表面也会有效。若将百合的鳞茎浸泡在0.1％的秋水仙素溶液中八小时左右，其鳞茎表面生出的不定芽，也会从鳞片中吸收到溶液，并可产生高比率的染色体加倍。其它带有鳞茎的植物，也可以用类似的方法诱发。但是，以秋水仙素处理水仙，却遇到了困难。1976年North在处理前先将鳞茎切成小块，并使每块上带有两个鳞芽，在鳞片之间滴加溶液处理，结果十分容易地使鳞芽细胞的染色体得到了加倍。 苗木网,www.999miaomu.com
在处理籽苗或植株的局部时，不会使整个籽苗或整条枝条的细胞染色体都得到加倍，因此，必须对材料进行检测，其指标可以以叶子的大小和宽度的增加或以气孔及叶片表皮细胞大小的差异性来表示。当检测局部的指标时，可以用镊子小心地撕下表皮，将处理过的和未处理的材料分别放在显微镜下进行同步镜检。凡得到染色体加倍的材料，其气孔的大小普遍增加10——30％。具体操作方法是，用指甲油在叶片上涂一薄层，待干后，将其表皮剥下放在显微镜下测量。这种方法对许多材料都能迅速办到，但是，对一些叶片上带毛的植物则不易办到。此外，以花粉粒的多少为指标进行测定也是可能的，因为多倍体的花粉一般都比二倍体多；但是需要等到开花后才能进行（详细操作待另篇叙述）。
有时用茎的频繁扦插和热冲击的办法也可以诱导染色体加倍，但都不如用秋水仙素处理来得可靠。当用秋水仙素溶液处理得不到预期效果时，还可以考虑在加压的条件下使用一氧化二氮。这一方法曾成功地获得四倍体的郁金香，并用它来生产种子。此外，还成功地诱导出四倍体的Crepisphalaris。一氧化二氮的作用，也是阻止接合子在第一次核分